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(自动蠕动泵)柱层析步骤介绍

时间:2021-06-08 16:50 点击:
1. 取样  
拿到样品后用毛细管蘸取少量的样品放入离心管中,加入相应的溶剂将样品溶解,标号后作为对照。
 
2. 跑板 
将取出的样品与要分离的样品点在同一块硅胶板上进行跑板,确定第几个点是将要分离出来的样品。 
3. 装柱 
将少量的棉花(棉花太少会露出硅胶,太多过滤的较慢)塞入柱子低端防治硅胶露出,配制硅胶溶剂时浓度应适当(浓度过大易造成干柱,溶度过小会大量浪费溶剂),将硅胶装入柱子直径的15—20倍高即可(柱子过高浪费时间且没有必要,柱子过低会造成物质没有分离开就应经被洗下)。 
倒入一定量的硅胶之后将硅胶压实,然后将溶液压**和硅胶面向近处,重复加入硅胶到达预定的高度,然后加入一定量的无水硫酸钠(作用是防治在加样时将硅胶面冲的变形),然后用手稍微弹动柱子将无水硫酸钠弹平,在溶剂将柱内壁的硅胶及无水硫酸钠洗净。 
4. 加样 
将样品用溶剂溶解后加入柱内(加入溶液时从中间像外圈旋转滴加,不要将柱面冲出坑),并用溶剂反复洗瓶子3遍左右(洗瓶子时将溶剂沿磨砂口加但不能碰到瓶内壁,否则会污染试剂),将洗后的液体转移**柱子内。 
5. 过柱 
先用滴管沿柱内壁加入溶液,溶液到达一定高度后再将配制的溶液倒入到柱子上面的球型漏斗内,加压,先用锥形瓶接取前面柱内的溶剂,然后当溶液到达一定的高度时开始用试管接,然后不断的检验试管中是否有样品洗出,当从有样品洗出到没有时,**个样品就被完全洗出,跳跃的点一定数量的点,然后进行跑板,确定没有自己要分离的样品后就可以倒掉,继续洗柱子。换取极性稍大的溶剂,分离到第二个样品后同**个做同样的处理,直**得到自己要的样品。 
6. 旋干 
将的的样品转移**圆底瓶中旋干,在将样品瓶安装好后,先打开冷凝系统和加热系统,然后打开旋转和抽气,缓慢关闭活塞,此时不停的观察是否有气泡,若有气泡应放入一定气体,然后缓慢关闭直**没有气泡,旋干后用油泵抽气(油泵的真空度比选转蒸发仪的真空度更大,能抽的更干)然后放入称量过质量的小瓶中,封口后放入冰箱内保存。 

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